Resistencia a fármacos antituberculosos en Cuba, 2015-2017 / Resistance to tuberculosis drugs in Cuba, 2015-2017

Introducción: La tuberculosis persiste como un importante problema de salud mundial. En el 2016 se estimaron 600 000 casos de resistente a rifampicina, y entre estos 490 000 casos multidrogorresistentes. Objetivo: Describir el comportamiento de la resistencia de los aislados de M. tuberculosis de pacientes con tuberculosis pulmonar notificados en Cuba entre los años 2015-2017. Métodos: Se determinó la susceptibilidad a isoniacida y rifampicina mediante el método de la nitratasa. A los aislados resistentes a rifampicina/multidrogorresistentes se les determinó mediante el método proporcional la susceptibilidad a ofloxacina, kanamicina, amikacina y capreomicina. Resultados: El 93,2 por ciento de los aislados fueron sensibles a isoniacida y rifampicina. En 39 se identificó resistencia a isoniacida y 23 fueron resistente a rifampicina. Se identificaron 10 multidrogorresistentes. No se detectó resistencia a fármacos de segunda línea. Conclusiones: Los resultados alertan sobre la necesidad de investigar las causas que han conllevado al incremento de la tuberculosis resistente en Cuba(AU)

Introduction: Tuberculosis continues to be an important health problem worldwide. In the year 2016, as many as 600 000 cases of rifampicin resistance were estimated, among which 490 000 were multi-drug resistant. Objective: Describe the behavior of resistance to M. tuberculosis isolates in patients with pulmonary tuberculosis reported in Cuba in the period 2015-2017. Methods: Susceptibility to isoniazid and rifampicin was determined by the nitratase method. Susceptibility of rifampicin resistant / multi-drug resistant isolates to ofloxacin, kanamycin, amikacin and capreomycin was determined by the proportional method. Results: Of the isolates analyzed, 93.2 percent were sensitive to isoniazid and rifampicin. Isoniazid resistance was identified in 39 and 23 were rifampicin resistant. Ten multi-drug resistant isolates were identified. Resistance to second line drugs was not detected. Conclusions: Results warn about the need to study the factors leading to the increase in resistant tuberculosis in Cuba(AU)

Diferencias en la fagocitosis de Mycobacterium habana TMC 5135 en cultivos celulares de macrófagos murinos / Differences in phagocytosis of Mycobacterium ´habana´ TMC 5135 by murine macrophages cellular cultures

La tuberculosis es uno de los mayores problemas que enfrenta la salud mundial en la actualidad. La única vacuna disponible contra esta enfermedad es la BCG, esta protege solo contra la tuberculosis grave de la infancia, lo cual plantea un reto en la búsqueda de nuevos candidatos vacunales. Teniendo en cuenta el antecedente protector de Mycobacterium ´habana´ contra la tuberculosis experimental, nos propusimos aportar elementos que avalen el empleo de M. ´habana´ TMC 5135 como candidato vacunal contra la tuberculosis, mediante estudios de infección en cultivos celulares de macrófagos murinos. Se caracterizó el proceso de fagocitosis de esta micobacteria por cultivos primarios de macrófagos peritoneales murinos y por la línea celular RAW 264.7, para lo cual se determinó el porcentaje de fagocitosis y el número fagocítico. El presente trabajo demostró que el proceso de fagocitosis de M. ´habana´ TMC 5135 está influenciado por la fuente celular empleada como célula hospedadora, así como por la carga bacteriana infectante y el tiempo de exposición a la misma. La presente investigación contribuye a la caracterización de la infección por esta micobacteria en sus principales células blanco de la inmunidad innata y traza el camino de futuras investigaciones para evaluar la activación de mecanismos efectores de la inmunidad innata frente a este candidato(AU)

Tuberculosis remains as a major problem in the global health. BCG is the available vaccine against tuberculosis but only protects against severe form of disease during childhood, so the search for new vaccine candidates is a challenge. Taking into account the protective capacity of Mycobacterium ´habana´ against experimental tuberculosis, we proposed in vitro experiments using murine macrophages (peritoneal macrophages and cell line Raw 264.7) to characterize phagocytic process of this candidate. Phagocitic index and phagocytic number were calculated. The present work demonstrated that the phagocytosis process of M. ‘habana’ TMC 5135 is influenced by the cellular source used as host cell, as well as by the infecting bacterial load and the time of exposure. The present investigation contributes to the characterization of the infection by this mycobacteria in its main target cells of innate immunity and it suggest future investigations to evaluate the activation of effector mechanisms of the innate immunity against this candidate(AU)

Diferencias en la fagocitosis de Mycobacterium habana TMC 5135 en cultivos celulares de macrófagos murinos / Differences in phagocytosis of Mycobacterium ´habana´ TMC 5135 by murine macrophages cellular cultures

La tuberculosis es uno de los mayores problemas que enfrenta la salud mundial en la actualidad. La única vacuna disponible contra esta enfermedad es la BCG, esta protege solo contra la tuberculosis grave de la infancia, lo cual plantea un reto en la búsqueda de nuevos candidatos vacunales. Teniendo en cuenta el antecedente protector de Mycobacterium habana contra la tuberculosis experimental, nos propusimos aportar elementos que avalen el empleo de M. habana TMC 5135 como candidato vacunal contra la tuberculosis, mediante estudios de infección en cultivos celulares de macrófagos murinos. Se caracterizó el proceso de fagocitosis de esta micobacteria por cultivos primarios de macrófagos peritoneales murinos y por la línea celular RAW 264.7, para lo cual se determinó el porcentaje de fagocitosis y el número fagocítico. El presente trabajo demostró que el proceso de fagocitosis de M. habana TMC 5135 está influenciado por la fuente celular empleada como célula hospedadora, así como por la carga bacteriana infectante y el tiempo de exposición a la misma. La presente investigación contribuye a la caracterización de la infección por esta micobacteria en sus principales células blanco de la inmunidad innata y traza el camino de futuras investigaciones para evaluar la activación de mecanismos efectores de la inmunidad innata frente a este candidato(AU)

Tuberculosis remains as a major problem in the global health. BCG is the available vaccine against tuberculosis but only protects against severe form of disease during childhood, so the search for new vaccine candidates is a challenge. Taking into account the protective capacity of Mycobacterium ´habana´ against experimental tuberculosis, we proposed in vitro experiments using murine macrophages (peritoneal macrophages and cell line Raw 264.7) to characterize phagocytic process of this candidate. Phagocitic index and phagocytic number were calculated. The present work demonstrated that the phagocytosis process of M. habana TMC 5135 is influenced by the cellular source used as host cell, as well as by the infecting bacterial load and the time of exposure. The present investigation contributes to the characterization of the infection by this mycobacteria in its main target cells of innate immunity and it suggest future investigations to evaluate the activation of effector mechanisms of the innate immunity against this candidate(AU)

Utilidad del método de la nitrato reductasa para la detección de resistencia a drogas antituberculosas de segunda línea / Usefulness of the nitrate reductase method to detect resistance to second-line anti-tuberculosis drugs

Introducción: el creciente hallazgo de cepas de Mycobacterium tuberculosis multidrogorresistentes extremadamente resistentes ratifica la importancia de ofrecer, de forma rápida, los resultados de susceptibilidad de M. tuberculosis a drogas de primera y segunda línea como única alternativa para evitar la transmisión. Objetivo: comparar el método de la nitrato reductasa y el de las proporciones para la detección de susceptibilidad a drogas antituberculosas de segunda línea en aislamientos clínicos de M. tuberculosis, recuperados de pacientes cubanos con tuberculosis multidrogorresistente. Métodos: se investigó, mediante el método de las proporciones en Löwenstein-Jensen y el de la nitrato reductasa, la susceptibilidad a la ofloxacina, la kanamicina y a la capreomicina en 34 aislamientos de M. tuberculosis multidrogorresistentes. Resultados: en tres aislamientos se evidenció un comportamiento extremadamente resistente por ambos métodos. Mediante el método de la nitrato reductasa los resultados estuvieron disponibles entre 7 y 14 días. La sensibilidad fue de 100 por ciento, 90,0 por ciento y 77,8 por ciento para la ofloxacina, la kanamicina y la capreomicina, respectivamente, mientras que la especificidad fue superior al 95,0 por ciento y el valor de kappa fue superior a 0,85 para las tres drogas. Conclusión: de acuerdo con los resultados alcanzados, consideramos que el método de la nitrato reductasa constituye una valiosa alternativa para la detección oportuna de tuberculosis extremadamente resistente en países con limitados recursos económicos(AU)

Introduction: The increase of multidrug resistant and extensively drug resistant tuberculosis underlines the urgent need to obtain early results of Mycobacterium tuberculosis susceptibility both to first and second line antituberculosis drugs in order to avoid dissemination of resistant isolates. Objective: The aim of this research was to compare the performance of the nitrate reductase assay and the proportion method for to detect the susceptibility to second line antituberculosis drugs in multidrug resistant clinical isolates of M. tuberculosis. Methods: The susceptibility to ofloxacin, kamamycin and capreomycin of 34 M. tuberculosis multidrug resistant isolates was investigated using the proportion method in Löwenstein-Jensen and the nitrate reductase assay. Results: Three isolates were identified as extensively drug resistant by both methods. The results of the nitrate reductase assay were obtained between 7-14 days achieving 100 percent, 90.0 percent and 77.8 percent of sensitivity for ofloxacin, kamamycin and capreomycin, respectively while specificity was higher than 95.0 percent and kappa value was higher to 0,85 for all drugs. Conclusion: The nitrate reductase assay represents a useful tool for the rapid identification of extensively drug resistant tuberculosis in low resources setting(AU)

Utilidad del método de la nitrato reductasa para la detección de resistencia a drogas antituberculosas de segunda línea / Usefulness of the nitrate reductase method to detect resistance to second-line anti-tuberculosis drugs

Introducción: el creciente hallazgo de cepas de Mycobacterium tuberculosis multidrogorresistentes extremadamente resistentes ratifica la importancia de ofrecer, de forma rápida, los resultados de susceptibilidad de M. tuberculosis a drogas de primera y segunda línea como única alternativa para evitar la transmisión. Objetivo: comparar el método de la nitrato reductasa y el de las proporciones para la detección de susceptibilidad a drogas antituberculosas de segunda línea en aislamientos clínicos de M. tuberculosis, recuperados de pacientes cubanos con tuberculosis multidrogorresistente. Métodos: se investigó, mediante el método de las proporciones en Löwenstein-Jensen y el de la nitrato reductasa, la susceptibilidad a la ofloxacina, la kanamicina y a la capreomicina en 34 aislamientos de M. tuberculosis multidrogorresistentes. Resultados: en tres aislamientos se evidenció un comportamiento extremadamente resistente por ambos métodos. Mediante el método de la nitrato reductasa los resultados estuvieron disponibles entre 7 y 14 días. La sensibilidad fue de 100 por ciento, 90,0 por ciento y 77,8 por ciento para la ofloxacina, la kanamicina y la capreomicina, respectivamente, mientras que la especificidad fue superior al 95,0 por ciento y el valor de kappa fue superior a 0,85 para las tres drogas. Conclusión: de acuerdo con los resultados alcanzados, consideramos que el método de la nitrato reductasa constituye una valiosa alternativa para la detección oportuna de tuberculosis extremadamente resistente en países con limitados recursos económicos(AU)

Introduction: the increase of multidrug resistant and extensively drug resistant tuberculosis underlines the urgent need to obtain early results of Mycobacterium tuberculosis susceptibility both to first and second line antituberculosis drugs in order to avoid dissemination of resistant isolates. Objective: the aim of this research was to compare the performance of the nitrate reductase assay and the proportion method for to detect the susceptibility to second line antituberculosis drugs in multidrug resistant clinical isolates of M. tuberculosis. Methods: the susceptibility to ofloxacin, kamamycin and capreomycin of 34 M. tuberculosis multidrug resistant isolates was investigated using the proportion method in Löwenstein-Jensen and the nitrate reductase assay. Results: three isolates were identified as extensively drug resistant by both methods. The results of the nitrate reductase assay were obtained between 7-14 days achieving 100 percent, 90.0 percent and 77.8 percent of sensitivity for ofloxacin, kamamycin and capreomycin, respectively while specificity was higher than 95.0 percent and kappa value was higher to 0,85 for all drugs. Conclusion: the nitrate reductase assay represents a useful tool for the rapid identification of extensively drug resistant tuberculosis in low resources setting(AU)

Micobacteriosis diseminada asomciada al complejo Mycobacterium avium-intracellulare (MAI), en paciente infectado con el virus de inmunodeficiencia humana / Disseminated mycobacteriosis associated with the Mycobacterium avium-intracellulare (MAI) complex in HIV infected patients

Se estudiaron diferentes tipos de muestras procedentes de una paciente de 27 años, diagnosticada como paciente SIDA luego de haber presentado un cuadro respiratorio agudo provocado por Pneumocistis carinii en 1997. A partir de ese momento la paciente siguió presentando cuadros respiratorios a repetición, hasta que ingresó en el Instituto de Medicina Tropical ôPedro Kouríö con cuadro diarreico crónico, pérdida de peso importante y anorexia extrema, acompañada de una constante tos húmeda, fiebre, etc. Se le realizaron los exámenes complementarios necesarios donde se resalta, un mantoux hiperérgico y niveles de células CD4 muy bajos (por debajo de 200 células/m3, conjuntamente se realizan estudios microbiológicos a partir de muestras de esputos, hemocultivos y líquido cefalorraquídeo, para descartar la presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes. Como resultado de estos estudios se logró el aislamiento repetitivo en todos los tipos de muestras trabajadas de una cepa de crecimiento lento, cremosa no pigmentada, perteneciente al grupo III de Runyon, la cual fue clasificada como perteneciente al complejo Mycobacterium avium-intracellulare. La paciente fue sometida a tratamiento con 4 drogas antibacilares, sin obtener resultado, pues a las 4 semanas de tratamiento falleció a causa de la diseminación total de esta infección. Se debe destacar que este ha sido el primer caso reportado y diagnosticado microbiológicamente de mycobacteriosis generalizada en paciente VIH+ por Mycobacterium avium-intracellulare

Micobacteriosis diseminada asomciada al complejo Mycobacterium avium-intracellulare (MAI), en paciente infectado con el virus de inmunodeficiencia humana / Disseminated mycobacteriosis associated with the Mycobacterium avium-intracellulare (MAI) complex in HIV infected patients

Se estudiaron diferentes tipos de muestras procedentes de una paciente de 27 años, diagnosticada como paciente SIDA luego de haber presentado un cuadro respiratorio agudo provocado por Pneumocistis carinii en 1997. A partir de ese momento la paciente siguió presentando cuadros respiratorios a repetición, hasta que ingresó en el Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí” con cuadro diarreico crónico, pérdida de peso importante y anorexia extrema, acompañada de una constante tos húmeda, fiebre, etc. Se le realizaron los exámenes complementarios necesarios donde se resalta, un mantoux hiperérgico y niveles de células CD4 muy bajos (por debajo de 200 células/m3, conjuntamente se realizan estudios microbiológicos a partir de muestras de esputos, hemocultivos y líquido cefalorraquídeo, para descartar la presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes. Como resultado de estos estudios se logró el aislamiento repetitivo en todos los tipos de muestras trabajadas de una cepa de crecimiento lento, cremosa no pigmentada, perteneciente al grupo III de Runyon, la cual fue clasificada como perteneciente al complejo Mycobacterium avium-intracellulare. La paciente fue sometida a tratamiento con 4 drogas antibacilares, sin obtener resultado, pues a las 4 semanas de tratamiento falleció a causa de la diseminación total de esta infección. Se debe destacar que este ha sido el primer caso reportado y diagnosticado microbiológicamente de mycobacteriosis generalizada en paciente VIH+ por Mycobacterium avium-intracellulare(AU)

Reporte de Mycobacterium avium-intracellulare asociado a micobacteriosis renal / Report of Mycobacterium avium-intracellulare associated with kidney mycobacteriosis

Se analizaron microbiológicamente, buscando la posible presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes, repetidas muestras de orina procedentes de un paciente que presentaba imágenes radiológicas de riñones multiquísticos, al cual le habían realizado estudios complementarios que evidenciaban una deficiencia renal. Como resultado se logró el aislamiento de una cepa micobacteriana no pigmentada, de crecimiento lento perteneciente al grupo III de Runyon; esta fue clasificada como Mycobacterium avium-intracellulare por estudios bacteriológicos convencionales y alternativos, como el análisis de las fracciones de ácidos micólicos micobacterianos por la técnica de cromatografía en capa delgada(AU)

Reporte de Mycobacterium avium-intracellulare asociado a micobacteriosis renal / Report of Mycobacterium avium-intracellulare associated with kidney mycobacteriosis

Se analizaron microbiológicamente, buscando la posible presencia de bacilos ácido-alcohol resistentes, repetidas muestras de orina procedentes de un paciente que presentaba imágenes radiológicas de riñones multiquísticos, al cual le habían realizado estudios complementarios que evidenciaban una deficiencia renal. Como resultado se logró el aislamiento de una cepa micobacteriana no pigmentada, de crecimiento lento perteneciente al grupo III de Runyon; esta fue clasificada como Mycobacterium avium-intracellulare por estudios bacteriológicos convencionales y alternativos, como el análisis de las fracciones de ácidos micólicos micobacterianos por la técnica de cromatografía en capa delgada

Identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando tiras de papel para la técnica de niacina

Se identificaron cepas de Mycobacterium tuberculosis con la utilización de tiras de papel para la técnica de niacina, elaboradas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del IPK. Se compararon los resultados obtenidos con la técnica de niacina convencional y se obtuvo el 100 % de coincidencia, se reportan las ventajas, sensibilidad y estabilidad de las tiras.

Identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis utilizando tiras de papel para la técnica de niacina / Identification of Micobacterium tuberculosis strains using paper strips by niacin technique

Se identificaron cepas de Mycobacterium tuberculosis con la utilización de tiras de papel para la técnica de niacina, elaboradas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis y Micobacterias del IPK. Se compararon los resultados obtenidos con la técnica de niacina convencional y se obtuvo el 100 por ciento de coincidencia, se reportan las ventajas, sensibilidad y estabilidad de las tiras (AU)

El laboratorio nacional de referencia de mycobacteria y tuberculosis dentro de la lucha antituberculosis en Cuba / The reference laboratory for mycobacteria and tuberculosis in the antituberculosis struggle in Cuba

Se realiza un breve análisis del problema de la tuberculosis en Cuba, destacándose la disminución en las tasas de mortalidad y morbilidad en valores de 15,4 a 0,5/100 000 habitantes y de 52,6 a 6,4/100 000 habitantes, respectivamente, en el periodo comprendido de 1964 a 1986. Se hace referencia a la participación del Laboratorio Nacional de Referencia de Mycobacteria y Tuberculosis en la organización del recurso bacteriológico para el diagnóstico y la búsqueda de casos en los laboratorios de la red del país, así como de sus actividades de control del servicio y las principales actividades científicas, consistentes en la introducción y aplicación de nuevas tecnologías vinculadas con las principales realizadas en la investigación de diferentes problemas relacionados con la tuberculosis y las micobacterias

Ensayo de un esquema de clasificación de cepas de mycobacterium tuberculosis por marcadores fagotípicos / Assay of a scheme for the classification of strain of mycobacterium tuberculosis by phagotypin

Se ensaya un sistema de clasificación para el marcaje fagotípico de 18 cepas de Mycobacterium tuberculosis, utilizando un juego de 10 micobacteriofágos, que incluye 4 fagos mayores y 6 fagos auxiliares o de subdivisión. De las 18 cepas se obtuvieron 5 del tipo A0, 3 del tipo A2, 3 de los tipos A4, A5 y B, que no habían sido informadas anteriormente en el país y I del tipo A3. Se logró una apertura en la diferenciación de las cepas de M. tuberculosis en el número de 16 subtipos diferentes, de los 6 tipos incialmente encontrados por el esquema, con los fagos mayores

Estudio comparativo de 41 muestras de esputos con baciloscopia positiva por los métodos del fosfato trisódico y el de Petroff

Se estudiaron 41 muestras de esputos positivos al examen directo por el método lento del PONa3 y por el método rapido del Na04 al 4(por ciento) de Petroff. Se obtuvo positividad en 31, muestras (75,6 por ciento) por el método del P04Na3 y resultaron negativas 10 muestras examinadas (24,4 por ciento). Ninguna de las muestras examinadas resultó contaminada. Por el método de Petroff se obtuvo positividad en 27 esputos (65,8 por ciento), mientras que 14 muestras fueron negativas (34,2 por ciento). Por este método, sin embargo: 7 muestras (17 por ciento) resultaron contaminadas. Se evidencia una eficacia simiíar por el método lento del P04Na3 comparado con el clásico de Petroff en cuanto a productividad, resultando aquel superior por el bajo índice de contaminación. Se destacan las ventajas de un método más simple que elimina la centrifugación y la neutralización disminuyendo el riesgo del manipulador y el costo en recursos y fuerza de trabajo(AU)

Crecimiento de las cepas del M habana en el medio UIT modificado (UIT-A)

Se informa el crecimiento del 322 cepas del M habana en el medio UIT modificado (UIT-A). Se obtienen crecimientos a partir del 10mo y 8vo días para la diluciones menos y más concentradas respectivamente, que mostraron disminución del tiempo de crecimiento del mismo con respecto a los medios anteriormente estudiados(AU)

Estudio comparativo de las fracciones lipídicas de las cepas 220, 337 y 493 del Mycobacterium habana y las cepas I, II y III del Mycobacterium simiae, por cromatografía en capa delgada

Se realizó un estudio comparativo de las cepas 220, 337 y 493 del M habana y las cepas 51, 52 y 53 del M simiae, para determinar sus patrones lípidos por la técnica de cromatografía en capa delgada. La extracción se realizó con una mezcla de cloroformo-metanol (2:1) y como eluentes se utilizó cloroformo-metanol-agua (65:25:4). La tinción copn orcinol permitió detectar las diferentes manchas, obteniéndose semejantes patrones en las cepas 220 y 493 del M habana, cuyos cromatogramas resultaron diferentes del de las cepas del M simiae y de las cepas 337 del M habana. Los cromatogramas de obtuvieron en corridas paralelas(AU)

Estudio cooperativo de la resistencia a las drogas antibacilares en cepas de M. tuberculosis (informe preliminar)

Se realizó un estudio de resistencia a las drogas INH, SM, PAS y Tbi de 430 cepas de M tuberculosis aisladas en el país desde agosto de 1978, hasta octubre de 1980. Se realizó el método proporcional de canetti en su variante estándar. Se encontró una resistencia primaria de 6(por ciento). La resistencia primaria a cada droga sola o asociada fue de 23 cepas (5,34)(por ciento) a la SM y de 15 cepas (3,48)(por ciento) a la INH. La resistencia secundaria fue de 23 cepas (5,34)(por ciento), de las cuales 19 (4,4(por ciento), lo fueron a la SM, 18 (4,18)(por ciento) a la INH, 8 (18)(por ciento) al PAS y 3 (0,69)(por ciento al Tbi. Ochenta y ocho cepas se clasificaron como resistencia indeterminada, correspondiendo la mayor cifra, 36 (8,37)(por ciento), a la SM(AU)

Estudio de 16 cepas de micobacterias cromogénicas y de crecimiento rápido: informe de 8 probables nuevas especies

Se presenta un estudio de 16 cepas de micobacterias pigmentadas y de crecimiento rápido procedente de tejido bovino, cuyas características fundamentadas en 80 pruebas realizadas a cada una de las diferentes micobacterias descritas, las ubican en el grupo IV de Runyon. Basados en las pruebas de carbohidratos y de su actividad amidásica, parecen pertenecer a 8 nuevas especies diferentes. Se proponen las siguientes nominaciones para las mismas: M liquefactum, M sufflavum, M pallidum, M perpallidum, M auratum, M armentum, M magistrae, M taurus(AU)